طراحی نسل جدید وکتور بیانی مشتق از pcold i با توانمندی بالا برای کلون سازی و بیان نانوپپتید ها
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه محقق اردبیلی - دانشکده علوم
- نویسنده حمید لطیفی نوید
- استاد راهنما صابر زهری سعید لطیفی نوید
- سال انتشار 1392
چکیده
امروزه پپتید های ضدمیکروبی به دلیل درک کاربردهای بسیار گسترده آن ها، تحت عنوان آنتی بیوتیک های نسل جدید نام برده می شوند. مقادیر زیادی از پپتید های با درجه خلوص بالا به منظور تحقیقات پایه و آزمایش های بالینی مورد نیاز می باشند. در مقایسه با فرایند جداسازی از منابع طبیعی و سنتز شیمیایی، رویکرد بیان نوترکیب ابزاری سودمند و اقتصادی برای تولید پپتید در مقادیر بالا محسوب می شود. با این وجود؛ طول کوتاه پپتیدهای ضدمیکروبی، یک عامل محدودکننده در راستای تحقق این رویکرد می باشد. دلیل این امر اضافه شدن یک یا چند آمینواسید در حین فرایند کلون سازی می باشد که منجر به از دست رفتن فولدینگ اصلی پپتید شده و تأثیر بسزایی در کاهش میزان عملکرد آن می گذارد. هدف از این تحقیق طراحی مکانیسمی جهت تغییر ساختمان وکتور pcold i به منظور بیان اختصاصی و کامل پپتیدهای ضدمیکروبی (بدون هیچ گونه آمینواسید اضافی در انتهای آمینی) با استفاده از روش جهش زایی مختص جایگاه می باشد. در واقع طراحی روش و تغییر در ساختار وکتور باید به گونه ای صورت گیرد که جایگاه برشی نخستین آنزیم محدودگر در جایگاه mcs در سطح نوکلئوتیدی با جایگاه عملکردی فاکتور xa در سطح آمینواسیدی یکسان باشد. توالی tee، برچسب هیستیدینی و جایگاه برش فاکتور xa توسط فاکتور xa حذف شده و هیچ آمینواسید اضافی در انتهای آمینی باقی نمی ماند. بر این اساس این وکتور تغییر یافته می تواند برای کلون سازی سریع و بسیار آسان و بیان اختصاصی انواع پپتیدهای کوتاه از جمله پپتیدهای ضد میکروبی و پپتیدهای ضد آنژیوژنز، ضد سلول های بنیادی سرطانی و ضد سلول های متاستازی استفاده شود.
منابع مشابه
کلون سازی و بررسی بیان ژن ureB هلیکوباکتر پیلوری با استفاده از وکتور بیانی pcDNA3.1(+)
مقدمه: هلیکوباکتر پیلوری عامل بیماری هایی مانند گاستریت، زخم های گوارشی و سرطان غدد لنفاوی و دستگاه گوارشی است. هنوز واکسن موثری علیه هلیکوباکتر پیلوری تولید نشده است. آنزیم اوره آز یکی از عوامل مهم تحریک سیستم ایمنی میزبان است. بنابراین هدف این تحقیق کلون سازی و بررسی بیان ژن ureB به عنوان کاندیدای واکسن ژنی علیه هلیکوباکتر پیلوری می باشد. روش کار: در این بررسی تجربی، ژن کد کننده ی ureB از ژنو...
متن کاملطراحی و ساخت وکتور بیانی اختصاصی کراتینوسیت های اپیدرمو بررسی بیان فاکتورIX انسانی به عنوان مدل
چکیده سابقه و هدف کراتینوسیت یک مدل مناسب برای بیان ژن به صورت ex vivo برای رهاسازی سیستمیک پروتئین است. با توجه به این نکته عناصر کنترلی اختصاصی کراتینوسیتها، گزینههای مناسبی برای بیان ژن با واسطه کراتینوسیتها هستند. در پژوهش حاضر یک وکتور برای بیان اختصاصی پروتئینهای نوترکیب در کراتینوسیتهای اپیدرم با استفاده از پروموتر ژن کراتینـ 14 انسانی طراحی گردید. توانایی پلاسمید ساختهشده ...
متن کاملطراحی و ساخت وکتور بیانی اختصاصی کراتینوسیت های اپیدرمو بررسی بیان فاکتورix انسانی به عنوان مدل
چکیده سابقه و هدف کراتینوسیت یک مدل مناسب برای بیان ژن به صورت ex vivo برای رهاسازی سیستمیک پروتئین است. با توجه به این نکته عناصر کنترلی اختصاصی کراتینوسیت ها، گزینه های مناسبی برای بیان ژن با واسطه کراتینوسیت ها هستند. در پژوهش حاضر یک وکتور برای بیان اختصاصی پروتئین های نوترکیب در کراتینوسیت های اپیدرم با استفاده از پروموتر ژن کراتین ـ 14 انسانی طراحی گردید. توانایی پلاسمید ساخته شده به ...
متن کاملطراحی، ساخت و بیان وکتور نوترکیب ژن نوکلئوپروتیین ویروس هاری
Background: Rabies is an acute encephalitis that causes more than 60,000 deaths worldwide. The only way to save individuals bitten by a rabies-infected animal is the timely use of effective vaccines. Treatment with new generation vaccines is expensive. Therefore, there is a global movement towards the production of less expensive vaccines which retain and improve upon the quality and effectiven...
متن کاملترانسفکشن رده سلولی PC12 بوسیله وکتور بیانی -NT4 pEGFPNIو بررسی بیان پروتئینی آن
سابقه و هدف: یکی از تکنیکهای پایهای مهم برای مطالعه یک پروتئین اختصاصی در بیولوژی مولکولی، کلون کردن و بیان آن در سلول میباشد. از جمله روشهای منتقل کردن ژن، روشهای غیر ویروسی است که کمهزینهتر، آسانتر و ایمنتر میباشند. یکی از ژنهای مهم که کاربردهای بالینی فراوانی دارد ژن NT4 است. این ژن یکی از اعضای خانواده نوروتروفیک است و در سلولهای گلیال سیستم اعصاب محیطی و مرکزی بیان میشود. این نورو...
متن کاملهمسانه سازی ژن ddh از Corynebacterium glutamicum در راستای افزایش تولید اسیدآمینه لیزین
سابقه و هدف: L لیزین یکی از اسیدهای آمینه ضروری است که به دلیل کاربرد بسیار در صنایع مختلف، در سال های اخیر تقاضا برای این اسید آمینه افزایش یافته و این منجر به گسترش تحقیقات برای تولید صنعتی این اسیدآمینه شده است. روش بررسی: در این پژوهش با بهینه سازی ژنتیکی سعی در افزایش بازده تولید این اسیدآمینه شد. پس از بررسی آنزیم های تاثیرگذار در مسیر بیوسنتز لیزین، ژن ddh کدکننده آنزیم دی آمینوپیملات ده...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه محقق اردبیلی - دانشکده علوم
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023